探针的保存方法主要包括以下步骤:
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脱盐处理:
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如果探针是蛋白质类探针,需要首先进行脱盐处理。这可以通过将探针溶解于含有0.1mol/L的EDTA溶液中进行,随后通过离心去除杂质和游离的EDTA。
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对于其他类型的探针(如核酸探针),也需要根据具体情况进行脱盐处理。
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保存液配制:
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根据探针类型选择合适的保存液。例如,用于杂交的寡核苷酸探针可选用含有20mmol/L乙酸三钠缓冲液的保存液。
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也可使用Tris-EDTA(TE)缓冲液或磷酸盐缓冲液作为保存液。
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保存条件:
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探针的保存需在一定的条件下进行,以确保其稳定性和活性。
- 通常,探针的保存应在-20℃至-80℃的环境中进行。冰冻可以较好地保持探针的活性,但解冻过程需谨慎操作,以避免活性损失。
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避免高温、强光和剧烈振荡,这些因素都可能导致探针失活。
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探针稀释与使用:
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根据实验需求,将探针从冷冻状态下解冻,并根据需要稀释到适当的浓度。
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使用时,要确保探针在适当的温度下短暂活性维持,一般不超过24小时。
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定期检测:
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定期对探针进行活性检测,以确保其性能未受影响。
- 如发现探针活性明显下降,应及时处理并更换。
***对于标记过的探针,还需注意以下几点:
- 标记过程中使用的酶制剂及连接酶等易被灭活,因此标记完成后应立即进行保存。
- 在保存及使用过程中应避免强光照射,以防止标记产物分解。
- 不同类型的探针有不同的保存期限,应根据具体类型和使用情况来确定保存时间和条件。
遵循上述步骤和方法,可以有效地保存探针,确保其在实验过程中的稳定性和活性。